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光纤探头的制作与修饰

将11cm长的石英光纤去除约6.5c m的涂覆层，然后将其放入30% HF中腐蚀适当时间，得到所
需锥角度(定义为腐蚀后纤芯的直径与未被腐蚀纤芯的直径之比，即d2/d,，参见图1)的组合型探头，锥型部分的长度约为0.5 c m,配制pira ha溶液(浓H2SO4:H2 二3:1)，将探头浸人其中30m in;然后放人超声波清洗仪中洗涤，并用超纯水进行充分清洗，直到清洗液的pH值为中性，最后在室温下用氮气吹干，保存于真空干燥箱中备用。为进行免疫分析，须将抗体或抗原固定到探头表面上。

按照文献的方法，先将探头硅烷化，将洁净的探头放人含2%M TS甲苯溶液中反应2h。用甲苯溶液清洗3次，然后放人0.02 m ol/LGMBS乙醇溶液中，反应1h后用乙醇冲洗3次，再用PBS冲洗干净。最后，将硅烷化好的探头放人0.05留L大鼠IgG中反应2h，用PBS冲洗后，在4℃冰箱保存备用。

荧光染料溶液的配制
准确称取 0.5 m g的Cy5.5 染料，用50A LD MSO溶解，配制成10g /LC y5.5 溶液，然后用PBS缓冲液配制成10 x 10-7 mo1VL原液。实验时按要求对原液进行稀释，配制不同浓度的C卢.5溶液。

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