分光光度计检定规程详细

V－2450是一款博得了用户高度评价的紫外可见分光光度计，性能卓越且操作简单方便，与功能强大的操作软件UVProbe结合，可以具备强大的功能。小光斑的光学系统使得微量的测定更为方便。

UV-2450紫外可见分光光度计特点

1.高水平的超低杂散光

UV－2550采用优异的DDM（双闪耀衍射光栅、双单色器）技术实现了超低杂散光（0.0003％以下）和高光通量。UV－2450虽然采用单单色器，杂散光也在0.015％以下。低的杂散光可以对高浓度的样品不进行稀释而直接测定。

2.通用型的软件UVProbe

UV－2450/2550通过新一代的中英文双语操作软件UVProbe控制，包含光谱测定、光度测定、动力学测定和报告处理四大模块，从基本的测定到研究解析都可以通过它实现。UVProbe实现了真正的QA/QC功能，完全支持GLP、GMP。另外还可以加载膜厚测定、色彩分析等软件。

3.丰富的附件选择和广泛的应用领域

生命科学领域：可对从生命体内得到的微量样品进行测试。 积分球测试：可以对浑浊样品和粉末状的样品进行测试。 反射附件：可以对光学材料进行相对反射和绝对反射的测定。

UV 2450紫外可见分光光度计检定规程

本仪器工作波段为190~900nm，，将其分为190~340nm、340nm~900nm两段分别检定。

1、计量性能要求

1.1波长最大允许误差：A段：±0.5，B段：±1.0

1.2波长重复性：A段：≤0.2，B段：≤0.5

1.3噪声与漂移：0%透射比：≤0.1；100%透射比：≤0.2；漂移：≤0.2

1.4透射比最大允许误差：A段：±0.5，B段：±0.5

1.5透射比重复性：A段：≤0.2，B段：≤0.2

1.6杂散光：A段：220nm，≤0.2；B段：360nm，≤0.2，420nm，≤0.5

1.7吸收池配套性：石英：220nm，0.5；玻璃：440nm，0.5

2、通用技术要求

2.1标志：名称、型号、编号、制造厂名、出厂日期、工作电源电压、频率。

2.2外观：

2.2.1仪器各紧固件均应紧固良好，各调节旋钮、按键和开关均能正常工作，

电缆线插件均能紧密配合且接地良好。

2.2.2仪器应能平稳的置于工作台上，样品架定位正确。

2.2.3指示器刻线粗细均匀、清洗，数字显示清晰完整，可调节部件不应有卡滞、突跳及显著的空回。

2.3吸收池：吸收池不得有裂纹，透光面应清洁，无划痕和斑点。

3、检定条件

3.1波长标准物质

3.1.1汞灯

3.1.2附有1，2，5nm三个光谱带宽下波长标准值的氧化钛、镨钕、镨铒滤光片3.1.3氧化钛溶液，40g/L

3.1.4干涉滤光片：波长峰值标准不确定度≤1nm，光谱带宽《15nm3.2透射比标准物质

3.2.1质量分数为0.06000/1000的重铬酸钾的0.001mol/L高氯酸标准溶液3.2.2紫外光区透射比滤光片

3.2.3光谱中性滤光片，其透射比标称值为10%，20%，30%3.3杂散光标准物质

3.3.1截止滤光片，使用波长分别为220，360，420nm，半高波长分别为260，400，470nm，截止波长分别不小于225，365，430nm，截止区吸光度不小于3，透光区平均透射比不低于80%。

3.3.2碘化钠标准溶液，浓度为10.0g/L3.2.3亚硝酸钠标准溶液，浓度为50.0g/L

3.4标准石英吸收池：规格为10.0mm，其透射比配套误差不大于0.2%

4、检定环境

4.1温度：10—35℃

4.2相对湿度：不大于85%

4.3电源：电压220±22V，频率50±1Hz

4.4仪器不应受强光直射，周围无强磁场、电场干扰，无强气流及腐蚀性气体。

5、检定项目

5.1通用技术要求

5.2波长示差误值与重复性

5.3噪声和漂移

5.4透射比示值误差与重复性

5.5杂散光

5.6吸收池配套性

6、检定方法

6.1通用技术要求检查：目视，手动检查

6.2波长最大允许误差及波长重复性

6.2.1标准物质

6.2.2检定步骤

根据已经选择的检定波长设定仪器的波长扫描范围（如果波长扫描范围较宽允许分段扫描）、常用光谱带宽，慢速扫描，小于仪器波长重复性指标的采样间隔。采用透射比或吸光度测量方式，根据设定的扫描参数用空气作空白进行仪器的基线校正，用挡光板进行暗电流校正，然后将标准物质垂直于样品光路中，设置合适的记录范围，连续扫描3次，分别检出透射比谷值或吸收度峰值波长λi。结果计算：将每个测量波长按下列公式计算波长示值误差：

λ=λ-λn

式中：

λ——3次测量的平均值

λn——波长标准值

按下式计算波长重复性：

λ=λmax-λmin

式中：λmax，λmin分别为3次测量波长的最大值与最小值

6.2.3噪声和漂移

选取250nm，500nm作为噪声测量波长；500nm为漂移测量波长。

设置仪器扫描参数为：时间扫描方式（或定波长扫描），光谱带宽2nm（固定光谱带宽的仪器不变），采样时间间隔1s，光度测量方式为透射比，记录范围为99%~101%（非扫描仪器不设），在每个测量波长处置参比光束与样品光束皆为空气空白，调整仪器透射比为100%，扫描2min，测量图谱上最大值与最小值之差（非扫描仪器记录2min内最大值与最小值），即为仪器透射比0%噪声。波长切换时，允许见光稳定5min。

自动扫描仪器，按上述要求测试透射比0%和100%噪声后，波长置于500nm处，扫描30min，读出扫描图包络线中心线的最大值和最小值之差即为仪器的透射比100线漂移。

6.2.4透射比最大允许误差和重复性

6.2.4.1用标准物质和标准吸收池，分别在235，257，313，350nm处测量透射比三次。

6.2.4.2用透射比标称值为10%，20%，30%的光谱中心滤光片，分别在440nm，546nm，635nm处，以空气为参比，测量透射比。6.2.4.3结果计算

按下式计算透射比误差

T=T-Tn

式中：T——3次测量的平均值

Tn——透射比标准值

按下式计算透射比重复性

T=Tmax-Tmin

式中：Tmax，Tmin——3次测量透射比的最大值与最小值

6.2.5杂散光

选择标准物质，在相应波长处测量标准物质的透射比，其透射比值即为仪器在该波长处的杂散光。

A段用碘化钠标准溶液（或截止滤光片）于220nm，亚硝酸盐标准溶液（或截止滤光片）于360nm（钨灯），10nm标准石英吸收池，蒸馏水做参比，测量其透射比值。

B段棱镜式仪器，用截止滤光片在波长420nm处，以空气为参比，测量其透射比值。

6.2.6吸收池配套性

仪器所附的同一光径吸收池中，装蒸馏水于220nm（石英吸收池）、440nm（玻璃吸收池）处，将一个吸收池的透射比调节至100%，测量其他各池的透射比值，其差值即为吸收池的配套性。

对透射比只有0—100%档的仪器，可用95%代替100%。

6.3检定结果的处理

以检定结果中最低级别注明仪器合格级别；若应检项目中，有一项检验结果不符合要求，既判为不合格，发给检定结果通知书，并注明不合格项目。

6.4检定周期

检定周期一般不超过1年，在此期间内，仪器经修理或对结果有怀疑时，应及时进行检定。