怎么用分光光度计制作标准曲线_制作标准曲线有什么意义

　　标准曲线的定义

　　标准曲线是指通过测定一系列已知组分的标准物质的某理化性质，从而得到该性质的数值所组成的曲线。标准曲线是标准物质的物理/化学属性跟仪器响应之间的函数关系。

　　在分析化学实验中，常用标准曲线法进行定量分析，通常情况下的标准工作曲线是一条直线。与校正曲线不同，它是以标准溶液及介质组成的标准系列，标绘出来的曲线。校正曲线的标准系列的伴生组分必须与试样相匹配，以便测量结果的准确。只有标准曲线与校正曲线相重合的条件下，才可以用标准曲线来代替校正曲线。

　　标准曲线应用

　　实用性，这是做标准曲线的重要前提；这个问题实际很简单：样品的仪器响应能否用标准曲线来推导其理化属性？答案建立在仪器响应的特异性和标准系列和样品的匹配性上面。一方面科学研究总是力求仪器的响应对于标准和样品是一视同仁；同时也要求样本跟标准基体匹配。这样，可以理解大多数分析要求标准曲线和样品同批测定（除非经过实验，标准曲线的变化不大），也可以理解在做大批量检测的时候要插入QC检验样本，以考察仪器的稳定性。

　　现有方法趋向于标准曲线适用于较宽的样品浓度范围。在较宽的浓度跨度和有限的标准点的情况下，均匀的分布浓度点是最佳选择，这样对该标准曲线覆盖的浓度范围内，对于所有的浓度所提供的信息量都是相同的。奇数点的设置来源于已知信息，先确定浓度的范围，在该浓度范围先确定中间点，然后在中间点左右分布对称的标准曲线点，所以出来的总是奇数个点。

　　分光光度计制作标准曲线步骤方法

　　1、配制相应的标准系列；

　　2、以空白为参比（或水）测得系列吸光度；

　　3、以标准溶液的吸光度为纵坐标，对应的标准溶液的含量为横坐标，找出相对的点；

　　4、将点用一条直线连接起来；尽量将点都落在线上；（绘制标准曲线；）

　　5、由此根据测得的样品的吸光度查找相对的含量；

　　分光光度法制作标准曲线的影响因素

　　标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线，是用来描述被测物质的浓度（或含量）在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。在分光光度法分析中，被测物质的浓度在仪器上的响应信号值在一定范围内呈直线关系，水样测定的结果可以从标准曲线上查出。因此标准曲线制作的好坏，将会影响测定结果的准确度。

　　1、标准曲线的表达式标准曲线应是一条通过原点的直线，如果坐标上各浓度点基本在一条直线上可不进行回归处理，但在实验中不可避免地存在测定误差，往往会有一、二点偏离直线，此时可用最小二乘法进行回归分析，然后绘制曲线，通常称为回归直线，而代表回归直线方程叫回归方程，表达式为：y=bx+a（式中：b为直线斜率，a为y轴上的截距，x为被测溶液的浓度，y为吸光度，是多次测定结果的平均值）。

　　在实际工作中，制作标准曲线的目的，是要借助它来查出水样中被测物质的浓度，而不是由x值通过回归方程去求得最可靠的y值，为了便于将观察到仪器响应信号值代入回归方程中直接计算试样的浓度或含量，勿需去绘制标准曲线再从曲线上查出被测物的浓度，改用下式计算;x=by+a（式中：a为x轴线上的截距，其它解释同前）。

　　2、标准曲线的参数标准曲线有3个参数，即相关系数r，斜率b

　　分光光度计制作标准曲线的意义

　　以某一特定波长条件下由分光光度计分别测出一系列不同溶度标准溶液然的吸光度值，以吸光光度值为纵坐标，相应的溶液浓度为横坐标，在坐标纸上可作出一条吸光度与浓度成正比通过原点的直线，称作标准曲线。绘制标准曲线的实用意义就是只要测得其吸光度值即可在标准曲线上查出相应的浓度值。